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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助:甲醇使细胞蛋白质变性会让细胞破裂吗？
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 求助:甲醇使细胞蛋白质变性会让细胞破裂吗？

我正在做细胞试验，处理样品中有一步是要破碎细胞，我的方法是加入高渗的PBS和甲醇的混合液震荡，然后液氮冻融，从而达到破碎细胞的效果；但是我现在发现甲醇会使蛋白变性，会固定细胞？！那细胞不是就没破了？     这个问题我始终没弄明白，希望各位虫友能给我帮助，谢谢！
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1楼 2009-01-21 19:33:41
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
破壁主要应当是液氮的作用
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会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-01-22 01:05:09
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
那我在液氮冻融之前加了甲醇混合液岂不是先把细胞固定了？
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3楼2009-01-22 13:42:46
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-31 13:58
甲醇是起到细胞固定和脱水的作用，但并不是意味着，细胞固定之后，液氮就不能破壁了，这两者没有必然联系。
你是不是要做免疫学的实验啊？

[ Last edited by sutao1979 on 2009-1-22 at 20:11 ]
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会当凌绝顶，一览众山小
4楼2009-01-22 20:07:41
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★ ★
司马诸葛(金币+3,VIP+0):谢谢指点 8-31 13:58
个人理解：
甲醇使细胞固定，意思是使蛋白变性在细胞原位，因为此时细胞形状已不能轻易改变，细胞失去了本来的柔性，各种细胞成分不会乱动，所以叫固定，此时细胞变的更脆，经过冻融热胀冷缩当然容易碎
固定是变性变脆僵直的过程，不是变得坚不可摧
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5楼2009-01-23 00:07:23
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
哈哈 了解了 谢谢各位的帮助！
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6楼2009-01-25 19:48:36
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