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对硝酸纤维素膜上的蛋白质染色 已有1人参与
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用甲基红溴酚蓝能染色蛋白质吗，我是想看我划在硝酸纤维素膜上的抗体情况？或者大家有没有其他方法？谢谢大家啦，急求 发自小木虫Android客户端 |
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3楼2017-07-10 19:44:31
晋鹏
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2017-07-11 07:15:24
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西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2017-07-11 07:15:24
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1、硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质，对蛋白有很强的结合能力，而且适用于各种显色方法，包括同位素，化学发光（Luminol类）、常规显色、染色和荧光显色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很简便，比如不需要甲醛预处理，只要在无离子水面浸润排出膜内气泡，再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了；比如NC膜很容易封闭，也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间，不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆，又容易卷，操作要小心，不适合用于需要多次重复清洗的用途--因为经不起多次“折磨”。 2、可以使用考马斯亮兰染色了，配方如下： 考马斯亮兰R250 0.4g 100%TCA（三氯醋酸） 100ml 蒸馏水 100ml 脱色液： 冰醋酸 1000ml 甲醇 500ml 蒸馏水 8500ml 请根据你所需用量配置，以免浪费。 |
2楼2017-07-05 20:18:30