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ruilipan

新虫 (初入文坛)

[求助] 对硝酸纤维素膜上的蛋白质染色 已有1人参与

用甲基红溴酚蓝能染色蛋白质吗,我是想看我划在硝酸纤维素膜上的抗体情况?或者大家有没有其他方法?谢谢大家啦,急求

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2017-07-11 07:15:24
1、硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高。NC膜的使用也很简便,比如不需要甲醛预处理,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了;比如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途--因为经不起多次“折磨”。

2、可以使用考马斯亮兰染色了,配方如下:
考马斯亮兰R250 0.4g
100%TCA(三氯醋酸) 100ml
蒸馏水 100ml
脱色液:
冰醋酸 1000ml
甲醇 500ml
蒸馏水 8500ml
请根据你所需用量配置,以免浪费。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-05 20:18:30
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ruilipan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-05 20:18:30
1、硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高。NC膜的使用也很简便,比如不 ...

非常感谢您的回复,我制作试纸条的,在硝酸纤维素膜上通过划膜仪喷的抗体,现在想看结合的抗体情况,所以想染下色,这种情况是考马斯亮蓝好还是丽春红染液好呢

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3楼2017-07-10 19:44:31
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