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jiuyuedefeng

铁虫 (初入文坛)

[求助] 转录组后功能基因的克隆与表达分析 已有1人参与

做完转录组后打算做功能基因验证,打算选取与脯氨代谢相关的P5CS与PDH等基因进行克隆与表达分析,这些基因的序列是从转录组的哪个注释文件中查找相关的基因号:NR,NT,KOG……?找到后的后续工作是不是先进行引物设计,PCR得到cDNA,然后进行race的得到全长,然后进行序列分析?大概过程是不是这样,这方面的小白,没做过相关实验,请求论坛里各位老师帮忙解决下,谢谢!
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2楼2017-06-27 22:32:15
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伤何处

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转录组是有参还是无参的?
有参的话,直接按照id号把序列调出来,设计引物扩增CDS序列。
无参的话,可能就要做RACE得到基因全长了。
对也罢,错也罢;正也罢,逆也罢;通途也好,崎岖无妨……但问,吾心坚否?若坚,纵使歧路,以铁心,贯穿而过,亦为大道!不坚,便是坦途,也难登临绝顶,观险峰
3楼2017-06-28 15:46:11
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