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含笑~

银虫 (正式写手)

[交流] PCR无条带

PCR无条带,重新修改了参数,将退火温度降至50℃,且将酶量提高了一倍,50Ul体系加2.5U,但还白的一片,连引物二聚体什么的都没有,怎么办?试剂和引物都是新的,试剂是用的TARAKA的一普通Taq,引物是上海英骏合成的。
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含笑~

银虫 (正式写手)

我曾经就退火温度咨询过,引物合成的技术这样说 :引物上的Tm是针对Na+测的,而PCR的退火温度是针对Mg2+的,叫我不要看上面的Tm,chyanqiu真是太感谢你的建议了  !可惜最近天天做培养基,生理生化,也没时间P,明天回家了,准备年后再来P。那个PCR仪我也没弄明白,只知道设一般的程序,其它的也没人可问,以前买的仪器,也不知道工程师的电话,分子不是这里的强项,真是见笑了,要怎样才知道是否可以做降落PCR呢
很感谢各位的建议!帮我很大忙!祝大家新年快乐!一切顺利!
22楼2009-01-23 17:04:37
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gr0613

铁虫 (初入文坛)

点了marker没有的?也许是你胶的问题呢。
2楼2009-01-17 22:43:19
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


lwf991229(金币+1):感谢参与讨论,欢迎常来~ 1-18 14:33
换个酶,90%的问题是酶的扩增能力问题
引物就算错配都能P出来的
再怎么恶心的体系,酶促反应又不是那么挑剔的
3楼2009-01-17 22:59:44
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含笑~

银虫 (正式写手)

点了marker,marker跑得很漂亮
4楼2009-01-18 09:22:17
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