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小儿科小医生

新虫 (小有名气)

[求助] 用核蛋白做western,敏感度是否提高?

请问各位大神,我今天做了大鼠组织的western,待检测蛋白是核蛋白,结果没有看到条带(免疫组化可见核内表达量高),是不是提取核蛋白后再做效果好一点?

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海燕^_^

新虫 (正式写手)

WB看不见条带的原因有很多,蛋白提取的怎么样?还有抗体之前有人用过吗?

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2楼2017-06-25 23:48:10
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海燕^_^

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小儿科小医生 at 2017-06-26 00:00:12
蛋白浓度有点低,抗体之前我用过,可以的
...

我都是全蛋白提取,感觉磷酸化的不好跑,别的基本都可以跑出来

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8楼2017-06-26 00:25:47
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 小儿科小医生 at 2017-06-26 01:18:21
那是不是我蛋白浓度低了?我的总蛋白浓度2点几
...

其实WB灵敏度挺高的

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坚持不下去了就再坚持一下
12楼2017-06-26 02:14:44
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普通回帖

小儿科小医生

新虫 (小有名气)

蛋白浓度有点低,抗体之前我用过,可以的

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3楼2017-06-25 23:59:21
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小儿科小医生

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 海燕^_^ at 2017-06-25 23:48:10
WB看不见条带的原因有很多,蛋白提取的怎么样?还有抗体之前有人用过吗?

蛋白浓度有点低,抗体之前我用过,可以的

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4楼2017-06-26 00:00:12
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5楼2017-06-26 00:10:14
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6楼2017-06-26 00:10:47
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7楼2017-06-26 00:11:34
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)

总蛋白是能检测到核里面的蛋白的!

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坚持不下去了就再坚持一下
9楼2017-06-26 00:30:50
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小儿科小医生

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 玄玄子 at 2017-06-26 00:30:50
总蛋白是能检测到核里面的蛋白的!

那是不是我蛋白浓度低了?我的总蛋白浓度2点几

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10楼2017-06-26 01:18:21
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