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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 用核蛋白做western,敏感度是否提高？
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小儿科小医生

新虫 (小有名气)

[求助] 用核蛋白做western,敏感度是否提高？

请问各位大神，我今天做了大鼠组织的western,待检测蛋白是核蛋白，结果没有看到条带（免疫组化可见核内表达量高），是不是提取核蛋白后再做效果好一点？

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1楼 2017-06-25 23:44:31
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海燕^_^

新虫 (正式写手)
WB看不见条带的原因有很多，蛋白提取的怎么样？还有抗体之前有人用过吗？

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2楼2017-06-25 23:48:10
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海燕^_^

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小儿科小医生 at 2017-06-26 00:00:12
蛋白浓度有点低，抗体之前我用过，可以的
...

我都是全蛋白提取，感觉磷酸化的不好跑，别的基本都可以跑出来

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8楼2017-06-26 00:25:47
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 小儿科小医生 at 2017-06-26 01:18:21
那是不是我蛋白浓度低了？我的总蛋白浓度2点几
...

其实WB灵敏度挺高的

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坚持不下去了就再坚持一下
12楼2017-06-26 02:14:44
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小儿科小医生

新虫 (小有名气)
蛋白浓度有点低，抗体之前我用过，可以的

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3楼2017-06-25 23:59:21
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小儿科小医生

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 海燕^_^ at 2017-06-25 23:48:10
WB看不见条带的原因有很多，蛋白提取的怎么样？还有抗体之前有人用过吗？

蛋白浓度有点低，抗体之前我用过，可以的

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4楼2017-06-26 00:00:12
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凤妹6月


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5楼2017-06-26 00:10:14
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凤妹6月


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6楼2017-06-26 00:10:47
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凤妹6月


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7楼2017-06-26 00:11:34
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)
总蛋白是能检测到核里面的蛋白的！

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9楼2017-06-26 00:30:50
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小儿科小医生

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 玄玄子 at 2017-06-26 00:30:50
总蛋白是能检测到核里面的蛋白的！

那是不是我蛋白浓度低了？我的总蛋白浓度2点几

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10楼2017-06-26 01:18:21
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