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小破同学

木虫 (小有名气)

[求助] 关于蛋白相互作用验证

各位实验大神,求助蛋白相互作用问题,我做两个膜蛋白相互作用验证,用胞外区做酵母双杂交看了下,没有相互作用,我还有必要用GST-pull down 来验证看看吗?膜蛋白相互作用验证用酵母双杂交也不合理,有没有什么更好点办法验证膜蛋白的相互作用?

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wusofa

金虫 (小有名气)

蛋白RNA相互作用研究

【答案】应助回帖

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小破同学: 金币+50, 博学EPI+1 2017-08-08 18:05:56
感觉现在酵母双杂交都用的不多了,现在更多的是用芯片,Pulldown或者Co-IP打质谱。
你这个只做了胞外区,并不能证明跨膜区和胞内区也没有相互作用。
如果只想证明这两个蛋白是否相互作用,可以做个Pulldown或者有好的抗体的话直接做Co-IP,western验证一下就可以了。
2楼2017-06-27 09:22:41
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