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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » Trizol 法提取线虫RNA
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yedansky

新虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 周易 at 2017-06-24 21:50:25
你研磨的也是线虫吗？
...

真菌

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11楼2017-06-25 05:45:50
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阳yang洒洒

新虫 (初入文坛)
我磨的是鞘翅目的触角，也跟你一样。你的问题解决了吗？

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12楼2017-06-25 18:34:13
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阳yang洒洒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-06-23 16:10:26
改用试剂盒吧，会省去很多时间。

什么试剂盒好用？

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13楼2017-06-25 18:34:29
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stabilized

银虫 (小有名气)
OMEGA公司
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坚持！
14楼2017-06-26 08:46:16
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15699321850

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 原来，是这样 at 2017-06-23 17:06:58
室温放置RNA晾干。。。这绝对会出问题啊，把EP管放到超净工作台里面吹一会，等到RNA快干（不能完全干，不然不好溶于DEPC水）再加DEPC水，有条件还可以加一点RNase抑制剂进去。跑胶的时候电泳相关试剂全部换新鲜的， ...

求问酶活试剂盒怎么用？？就是测酶活前组织该怎么处理？?？求具体步骤。。。测不同酶活用不同裂解液？？试剂盒中不包括裂解成分？？
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15楼2017-07-17 17:58:53
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ssd一级生

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Trizol试剂盒提取。先收集L4时期的线虫，一般2000条到1.5ml EP管中加500ul trizol匀浆（研磨）2min，研磨后再加500 ul trizol ,RT孵育30min，加200 ul氯仿，vortex 15s，RT孵育15min，4℃离心（12000g/15min）.转移上层液相至新的1.5 ml EP管（不要吸到中间相），加500 ul 100%异丙醇，RT孵育10min ，RT离心（12000g/15min）,移走上层液体，加1ml 75%的酒精清洗，上下颠倒几次即可，RT离心（7500g/5min），吸走酒精，空气中干燥。加15 ul ddH2O溶解。
整个过程中要注意RNA酶的污染。
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16楼2018-10-26 17:27:55
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