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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » Trizol 法提取线虫RNA
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周易

新虫 (初入文坛)

[求助] Trizol 法提取线虫RNA 已有2人参与

最近一直用Trizol法提取线虫RNA，这个方法好像是从提植物的RNA改进的，提了几十次，要么就是什么也提不出来，要么就是降解了，请教一下这是什么方面的错误，方法上有不对的地方吗？

Trizol 法提取线虫RNA


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1楼 2017-06-23 10:48:44
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yedansky

新虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 周易 at 2017-06-24 13:20:12
EP管用的是无酶的，研磨的时候没有把液氮回到样品里，是把离心管放到磨人的液氮里泡一会之后拿出来研磨，再泡再研。
...

噢，我直接用高压过的研钵研磨的，研磨三次，后来效果还不错

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9楼2017-06-24 19:45:24
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stabilized

银虫 (小有名气)
改用试剂盒吧，会省去很多时间。
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坚持！
2楼2017-06-23 16:10:26
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原来，是这样

金虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-23 23:22:48
室温放置RNA晾干。。。这绝对会出问题啊，把EP管放到超净工作台里面吹一会，等到RNA快干（不能完全干，不然不好溶于DEPC水）再加DEPC水，有条件还可以加一点RNase抑制剂进去。跑胶的时候电泳相关试剂全部换新鲜的，不然很容易降解。实验中各种操作都要在冰上进行更好。

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3楼2017-06-23 17:06:58
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周易

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 原来，是这样 at 2017-06-23 17:06:58
室温放置RNA晾干。。。这绝对会出问题啊，把EP管放到超净工作台里面吹一会，等到RNA快干（不能完全干，不然不好溶于DEPC水）再加DEPC水，有条件还可以加一点RNase抑制剂进去。跑胶的时候电泳相关试剂全部换新鲜的， ...

谢谢你，请问，第三步加氯仿，是在离心后加还是在离心前加？③④步的位置需要换一下吗？

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4楼2017-06-23 22:28:42
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