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灵风2013

新虫 (初入文坛)

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气溶胶污染，把扩增循环数降低，30或25。能看到阴性对照和你的样品出现区别。或者买一个避免污染的pcr试剂盒

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21楼2017-06-24 10:48:23

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yafen0628

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21楼: Originally posted by 灵风2013 at 2017-06-24 10:48:23
气溶胶污染，把扩增循环数降低，30或25。能看到阴性对照和你的样品出现区别。或者买一个避免污染的pcr试剂盒

气溶胶污染与目的片段的大小有关系吗？

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22楼2017-06-24 12:20:07

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yafen0628

金虫 (正式写手)

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有做降低循环数目，阴性对照组和样本组能够看出差异，但是，阴性对照组带还是存在，没能解决到根本上

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23楼2017-06-24 12:22:41

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灵风2013

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22楼: Originally posted by yafen0628 at 2017-06-24 12:20:07
气溶胶污染与目的片段的大小有关系吗？
...

不确定，你可以试试把阴性对照和样品分不同时间，不同区间配制体系，在反应的时候放在不同的PCR仪里。

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24楼2017-06-24 13:31:23

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宁文峰

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把能换的都换了，枪头高压，反应管使用free的，加上楼上所说的在台子里做（做的时候把风关了），使用带滤芯枪头，或借用其他实验室的枪p一下，如果还有污染，就测一下序列，看看污染条带和目的条带是不是一个东西，如果是重新斟酌上面几点，如果不是，就是引物特异性有问题，只是大小恰好相同而已。。，

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