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DCFH-DA体外测材料ROS问题 已有1人参与
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| 求助各位大神，有没有用DCFH-DA测体外ROS的，就是材料表面的，不加细胞，是应该怎么操作？是不是要将DCFH-DA先变成DCFH，如果是的话，加什么东西可以？ |
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冰点降温: 金币+1, 谢谢回帖交流，欢迎常来无机物化版块。 2017-06-27 09:19:01
Knight_Lu(冰点降温代发): 金币+2 2017-06-27 09:19:05
冰点降温: 金币+1, 谢谢回帖交流，欢迎常来无机物化版块。 2017-06-27 09:19:01
Knight_Lu(冰点降温代发): 金币+2 2017-06-27 09:19:05
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2.6. Chemical ROS assay To study the insonation induced ROS generation in solution, RB4 was tested using a modified 2′, 7′–dichlorofluorescin diacetate (DCFH DA) assay. DCFH-DA (1 ml, 1 mM in MeOH, Aldrich) was hydrolyzed in NaOH aqueous solution (0.01 N, 4 ml) at RT for 30 min to yield a non fluorescent DCFH intermediate. The solution was neutralized with 20 ml of NaH2PO4 (25 mM) and shielded with aluminum foil. The final solution of DCFH was around 40 μM. RB4 (1.0 mg) was dissolved in DMSO (1 ml), and then diluted with water into a 20 μM solution. The RB4 solution (20 μM, 10 ml) was mixed with a DCFH solution (40 μM, 10 ml) as the test solution. The test solution (0.5 ml) was placed into each well of a 24-well plate. The DCFH solution without RB4 was included as a background control. The plates were treated with ultrasound (0.4–1.2 watt/cm2) one well by one well for 30 s; the insonated wells were then checked using a fluorescence plate reader, ex 485 nm/em 520 nm. |
2楼2017-06-26 17:44:50
3楼2017-10-09 14:15:58
lufengying
金虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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我正好看见有一篇关于体外测定ROS，分享一下不知道对你有没有用。 |
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2017-10-17 10:10:49, 2.5 M
4楼2017-10-17 10:13:04