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线性化载体胶回收浓度怎么办？已有2人参与
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我用的诺维赞一步克隆试剂盒，先将表达载体酶切为线性化载体，再利用同源重组原理将目的基因连接到载体上，现在问题是线性化载体胶回收浓度才8.9纳克每微升，插入片段是30纳克每微升，说明书要求线性化载体使用量为0.03pmol，插入片段使用量为0.06pmol，根据我片段计算线性表达载体需要加220纳克，插入片段需要加30纳克，由于表达载体胶回收浓度太低，重组后做转化板子上没有长菌落，请问怎么提高胶回收浓度啊？现在胶回收用的康为试剂盒。下图为酶切之后跑胶图。 IMG_2034.JPG |
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你的条带挺亮的，切胶的时候尽量切的准确，不要切到过多的空胶。我们实验室用的天根的盒子，回收率还挺高的。 发自小木虫IOS客户端 |
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7楼2017-06-22 08:06:28
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