| 查看: 1931 | 回复: 1 | |||
爱总是年轻新虫 (小有名气)
|
[交流]
接合转移后单交换与双交换筛选疑问求助 已有1人参与
|
|
在无痕敲除的过程中，将含有重组自杀载体pJQ200SK（Gm）的供体菌大肠杆菌S17-1和受体菌假单胞菌A菌株进行接合转移，对于这部分的实验我有几点不明白，还希望懂得以及做过的老师指点一二： 1.S17-1用的LB培养基，受体菌A用的是PM培养基，将两个菌分别培养至对数期之后，按比例进行混合，点种于滤膜上，那么滤膜是应该贴在那个培养基上LB还是PM呢？ 2.培养一定时间后，收集滤膜上的菌苔，进行第一次筛选，通过抗性筛选，这个时候我又应该用的是哪个培养基+抗生素，才能筛选得到单交换子？ 3.筛选得到单交换子后，如何通过蔗糖进行第二次筛选？具体操作怎么样进行？ （备注：受体菌通常是光照厌氧培养） 这些问题已经困惑很久，参考很多文献，仍有不懂之处，求指教！感激不尽  |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有187人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
2楼2018-05-24 08:10:31
