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桂桂5708

木虫 (著名写手)

[求助] 总RNA提取效率是否会影响后面的Ct值? 已有1人参与

如题,做荧光定量PCR实验,在血清样本中加入一定量的拟南芥,如果提取效率低的话,是否会影响它的Ct值呢?如果提取后的总RNA的纯度和总量不是那么好,那些存在的盐类和蛋白也会影响结果吗?谢谢~~~~~~~~~~~~
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慷慨丈夫志,生当忠孝门,为官须做相,及第必争先.
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

在纯度低的时候,因为存在基因组D你A的污染,

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3楼2017-06-15 16:00:12
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MulanQahar

金虫 (正式写手)

1. 没明白提取效率低的意思。2. 纯度不好的时候,肯定会受影响。但是浓度低的时候,未必会。

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2楼2017-06-15 15:48:03
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MulanQahar

金虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-19 11:53:28
DNA 的污染,会出现很多的非特异性的扩增。因而影响Ct value.

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4楼2017-06-15 16:02:49
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桂桂5708

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-15 15:48:03
1. 没明白提取效率低的意思。2. 纯度不好的时候,肯定会受影响。但是浓度低的时候,未必会。

因为在提取后,RNA的浓度还不到10ng/ul,A260/280才1.0左右。
慷慨丈夫志,生当忠孝门,为官须做相,及第必争先.
5楼2017-06-15 16:34:05
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