24小时热门版块排行榜    

查看: 691  |  回复: 12
当前主题已经存档。

GinTonic

金虫 (小有名气)

[交流] PCR产物回收产率低

各位虫友,最近不知道咋回事,PCR产物胶回收产率极低,150ul的PCR产物胶回收后只得到100——200ng的目的片段,我的片段在2000bp左右,用的是博大泰克的胶回收kit,都要疯掉了,这么少的量怎么酶切回收啊 。谁能给我点指点啊
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来!
我用QIAGEN的一直没问题
洗脱的时候,要滴在膜中央,然后静置久一点
第一次洗脱的液体,重新加回柱子,然后再洗脱一次
2楼2009-01-14 22:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

speculiar

银虫 (小有名气)

是不是乙醇挥发了?
3楼2009-01-15 10:51:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingxiong

木虫 (正式写手)

加洗脱液后要静止,加热水回收效果也要好些
4楼2009-01-15 21:12:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wujie412

铜虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-31 14:10
你看看你的洗脱液的PH值,要大于7才行
5楼2009-01-15 21:35:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GinTonic

金虫 (小有名气)

洗脱液我都用的超纯水,PH值没有在意,多谢了,下次注意下
6楼2009-01-16 11:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-31 14:10
建议你换一个试剂盒 我一直用的是TAKARA的 博大回收的就是效率不太高
7楼2009-01-16 12:06:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leox863

铁杆木虫 (著名写手)

PCR后从来只做清洁不回收,觉得没有必要,KOD-Plus-产物条带很干净,何必在带上EB,博大的盒子的却也不怎样,用Omega吧。
simm
8楼2009-01-16 22:00:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小木虫8580

金虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~欢迎常来~
顶一下,天气冷的话用什么试剂盒都效率不高,omega的提取效率不错,

还是要注意温度
9楼2009-01-16 22:13:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GinTonic

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 小小木虫8580 at 2009-1-16 22:13:
顶一下,天气冷的话用什么试剂盒都效率不高,omega的提取效率不错,

还是要注意温度

想想也真是有道理啊 我夏天做的时候得率还不错,就是最近一两个月总是得率很低。
只作清洁,指的是过柱还是用专用的kit,还是用酚氯仿抽提?
10楼2009-01-17 00:56:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 GinTonic 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +11 YXCT 2026-03-01 13/650 2026-03-02 21:38 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +5 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 9/450 2026-03-02 21:33 by sunny81
[考研] 295求调剂。一志愿报考郑州大学化学工艺学硕,总分295分 +8 yl1 2026-03-02 9/450 2026-03-02 21:21 by sunny81
[考研] 理学,工学,农学调剂,少走弯路,这里欢迎您! +5 likeihood 2026-03-02 8/400 2026-03-02 20:39 by ji493940045
[考研] 0856材料调剂 +5 沿岸有贝壳OUC 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:31 by hypershenger
[考研] 0854总分272 +3 打小就是老实人 2026-03-02 4/200 2026-03-02 19:49 by 求调剂zz
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 5/250 2026-03-02 19:19 by 轻松不少随
[考研] 283求调剂 +5 鹿沫笙 2026-03-02 5/250 2026-03-02 19:19 by zhukairuo
[考研] 材料调剂 +3 恒顺自然 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:49 by L135790
[考研] 一志愿东北大学化学314分求调剂 +3 lr1212.. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:36 by yeahyou
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 9/450 2026-03-02 12:04 by 52hz~~
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +4 hit_aiot 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:53 by 一声问好
[考研] 材料调剂 +6 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:42 by Jy?
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
信息提示
请填处理意见