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hqqwdm

新虫 (正式写手)


[交流] 两段DNA短片段分别插入质粒,该如何选取质粒

各位虫友:

我想把2个不同的DNA短片段插入到质粒的不同区域(如A片段插入到质粒的某一位点,相隔200~300bp,再将B片段插入到质粒中),想知道该如何选择质粒,怎样才能实现这种插入?

谢谢!
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stabilized

银虫 (小有名气)



hqqwdm(金币+1): 谢谢参与
估计得比对下序列
2楼2017-06-14 09:44:36
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hqqwdm

新虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-06-14 09:44:36
估计得比对下序列

请问 比对序列是什么意思,我这2个DNA短片段几乎一样
3楼2017-06-14 10:03:55
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)



hqqwdm(金币+1): 谢谢参与
如果你是新手的话,建议你包出去做吧,这个难道不难,就是有点小麻烦。方法有3种:1.分别插入,相当于做两次连接转化;2. overlapPCR;3.无缝克隆一次搞定。
4楼2017-06-14 10:17:33
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hqqwdm

新虫 (正式写手)


引用回帖:
4楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2017-06-14 10:17:33
如果你是新手的话,建议你包出去做吧,这个难道不难,就是有点小麻烦。方法有3种:1.分别插入,相当于做两次连接转化;2. overlapPCR;3.无缝克隆一次搞定。

我是新手,但是还想自己做

不知道能不能具体说说这三种方法该怎么做呢?
5楼2017-06-14 10:26:09
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