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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 两段DNA短片段分别插入质粒，该如何选取质粒
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hqqwdm

新虫 (正式写手)

[交流] 两段DNA短片段分别插入质粒，该如何选取质粒

各位虫友：

我想把2个不同的DNA短片段插入到质粒的不同区域（如A片段插入到质粒的某一位点，相隔200~300bp，再将B片段插入到质粒中），想知道该如何选择质粒，怎样才能实现这种插入？

谢谢！
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1楼 2017-06-14 09:19:02
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stabilized

银虫 (小有名气)
★
hqqwdm(金币+1): 谢谢参与
估计得比对下序列
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2楼2017-06-14 09:44:36
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hqqwdm

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-06-14 09:44:36
估计得比对下序列

请问 比对序列是什么意思，我这2个DNA短片段几乎一样
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3楼2017-06-14 10:03:55
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
★
hqqwdm(金币+1): 谢谢参与
如果你是新手的话，建议你包出去做吧，这个难道不难，就是有点小麻烦。方法有3种：1.分别插入，相当于做两次连接转化；2. overlapPCR；3.无缝克隆一次搞定。
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4楼2017-06-14 10:17:33
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hqqwdm

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2017-06-14 10:17:33
如果你是新手的话，建议你包出去做吧，这个难道不难，就是有点小麻烦。方法有3种：1.分别插入，相当于做两次连接转化；2. overlapPCR；3.无缝克隆一次搞定。

我是新手，但是还想自己做

不知道能不能具体说说这三种方法该怎么做呢？
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5楼2017-06-14 10:26:09
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