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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助，质粒提取出现大量杂质堵塞管
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13798753834

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助，质粒提取出现大量杂质堵塞管 已有3人参与

本人使用临床分离的高粘液性的肺克分离纯化之后，LB摇菌5小时（菌量足够了），采用北京全是金的质粒提取试剂盒（碱裂解法），在加入中和液（Neutralization Buffer）再离心之后发现上清非常浑浊（本来应该是澄清透明），上清加入柱子之后导致柱子堵塞。请问有没有做粘液性肺克的朋友们遇到这种问题？应该怎么解决呢？
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1楼 2017-06-13 16:15:08
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福建啊萧

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种提取要去多糖，用老法提DNA提吧
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2楼2017-10-13 09:41:28
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没有混合均匀，用的是sds的方法吧

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你好
3楼2017-10-21 13:37:08
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
中和后，混浊正常的，你这个堵柱说明菌悬液没有按照要求做，浓度太大了。降低浓度到说明书要求再试试

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4楼2017-10-21 22:26:44
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13798753834

新虫 (初入文坛)
感谢各位解答，后来换了QIAGEN的盒子提，提高离心转速和时间，问题就解决了

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5楼2017-11-09 00:34:52
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