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新虫 (初入文坛)

[交流] 求助,质粒提取出现大量杂质堵塞管 已有3人参与

本人使用临床分离的高粘液性的肺克分离纯化之后,LB摇菌5小时(菌量足够了),采用北京全是金的质粒提取试剂盒(碱裂解法),在加入中和液(Neutralization Buffer)再离心之后发现上清非常浑浊(本来应该是澄清透明),上清加入柱子之后导致柱子堵塞。请问有没有做粘液性肺克的朋友们遇到这种问题?应该怎么解决呢?
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福建啊萧

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种提取要去多糖,用老法提DNA提吧
2楼2017-10-13 09:41:28
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没有混合均匀,用的是sds的方法吧

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你好
3楼2017-10-21 13:37:08
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
中和后,混浊正常的,你这个堵柱说明菌悬液没有按照要求做,浓度太大了。降低浓度到说明书要求再试试

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4楼2017-10-21 22:26:44
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13798753834

新虫 (初入文坛)

感谢各位解答,后来换了QIAGEN的盒子提,提高离心转速和时间,问题就解决了

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5楼2017-11-09 00:34:52
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