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记忆神恩

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师您好,我用液质联用测中药样品没有重复性怎么办?同一个样品... 已有1人参与

老师您好,我用液质联用测中药样品没有重复性怎么办?同一个样品同一种方法进样5针,抽提离子图中每一针出峰时间和出峰的个数都不同。用的是ekspert100UPLC串联AB3200Qtrap。方法是EIS负离子Q1扫描。流动相0.01%甲酸的甲醇很水。

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chihaijun

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议:
1. 如果使用ESI源负离子扫描,流动相最好不加甲酸,过多的H+会抑制你的目标化合物信号,(一般的,正离子扫描加甲酸),如果样品检测需要改变流动相pH值,可以尝试甲酸铵、乙酸铵;
2. 不知道你的液相条件是否合适:在您设定的分析时间内,流动相是否将样品中所有物质都洗脱出来?如果分析时间短,洗脱强度又不够,有可能上一针没有洗脱出来的化合物顺延到下一针才被洗脱出来,在连续进样时,出峰时间和峰的个数重现性自然就会很差;
3. 看你的条件,是不是想采用Q1全扫描,先做简单定性?为什么想到采用抽提离子图处理数据呢?我建议先Q1全扫描得到TIC数据,定性分析出你感兴趣的化合物谱峰,在此基础上利用Trap精确定性定量分析。
2楼2017-06-13 08:24:41
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记忆神恩

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chihaijun at 2017-06-13 08:24:41
建议:
1. 如果使用ESI源负离子扫描,流动相最好不加甲酸,过多的H+会抑制你的目标化合物信号,(一般的,正离子扫描加甲酸),如果样品检测需要改变流动相pH值,可以尝试甲酸铵、乙酸铵;
2. 不知道你的液相条件 ...

老师,我流动相改成了纯甲醇个水,分析时间也做了延长,流速1ml/min,可是还是有问题。TiC图也没有明显的峰,这该如何是好呢?

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3楼2017-06-13 23:21:07
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chihaijun

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 记忆神恩 at 2017-06-13 23:21:07
老师,我流动相改成了纯甲醇个水,分析时间也做了延长,流速1ml/min,可是还是有问题。TiC图也没有明显的峰,这该如何是好呢?
...

不知道你前处理过程是不是合理,样品是否经过浓缩达到一定的浓度,前处理很重要!液质联用时为了提高响应信号可以在流动相中适当加挥发性缓冲盐。另外,您使用ESI源,液相流速1ml/min,如果不分流,这个流速对ESI源来说偏高,常规ESI源的流速应该在0.2-0.4更合适。
4楼2017-06-14 07:42:56
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cher33448

新虫 (初入文坛)

我很同意上一位老师说的,首先你要搞清楚你要的峰是哪个,第二个你要用上面模式去做质谱的定量,怎么样排除干扰,第三你处理数据的模式貌似是有问题的,如果你出正式的方法出去,是不会被认同的,第四,我建议你不要用中性的流动相,看化合物的性质来添加,添加剂 ,增强响应。
5楼2017-06-14 15:57:57
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fanxb006

木虫 (正式写手)

负离子模式下,流动相加点挥发性的盐,甲酸铵或乙酸铵都行,5mmol/L

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6楼2017-07-15 16:54:19
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