24小时热门版块排行榜    

查看: 543  |  回复: 4
当前主题已经存档。

sdauxxx

新虫 (小有名气)

[交流] Tail-PCR扩增不出产物,为什么呢?

我现在做禾谷镰刀菌T-DNA插入突变体的TAIL-PCR,可扩了几次都扩不出来,引物好像没什么问题,那位可以给指点一下,不胜感激啊!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-5 at 20:14 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

annwt

木虫 (正式写手)

你是用兼并引物吗,
注意的问题:
1,DNA应该完好,最好是新提的,并且不能含有SDS和酚等,那些家伙太讨厌。
2,时间上,程序应该一天跑完,决不能托,
3,技术应该熟练,毕竟不是一管的样,应该加样熟练准确。
4。有时间好好阅读文献,理解步骤的含义。刘的文章很经典。
2楼2009-01-13 17:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

tail pcr主要就是简并引物的设计,特异和非特异pcr相结合的一种方法,用来克隆为止的序列,相对于不同物种的对密码子的偏爱,所以简并引物也会有所差异,个人认为还是从引物设计和pcr条件摸索着手。
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-01-15 03:20:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

1 你确定突变体是插进去了吗,是否是突变假阳性,设计引物扩增插入序列
2 采用SEFA-PCR,我们一个老师的文章,试剂盒就是这个方法为原理
帮助虫友,提升自己
4楼2009-01-16 12:50:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sdauxxx

新虫 (小有名气)

谢谢了……
5楼2009-03-27 16:53:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sdauxxx 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +14 tcxiaoxx 2026-03-20 16/800 2026-03-25 23:14 by peike
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +8 Mr. Z 2026-03-25 8/400 2026-03-25 23:00 by peike
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-20 4/200 2026-03-25 10:16 by allen-yin
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见