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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于转化问题
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新虫 (初入文坛)

[求助] 关于转化问题 已有1人参与

目的基因连接T载体，转化到大肠杆菌DH5a，菌落pcr鉴定有目的条带，但是提质粒却提不出来，养菌的时候菌也长得特别慢，不知道为什么

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1楼 2017-06-06 14:13:57
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13332465896

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先，说明一下质粒提取不成功的问题，如果排除个人操作问题，最大可能就是转化效率低，以至于没有成功。第二个问题是菌落PCR有目的条带的问题，这个结果并不能直接证明你转化成功了，结合你提取质粒不成功的结果，很有可能是你PCR的试剂由于操作不当等原因污染了目的片段。建议你换一套新的PCR试剂从新试验。
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学术与自由
2楼2017-06-06 17:58:04
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