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linglan2612金虫 (正式写手)
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[求助]
求助关于枯草芽孢杆菌转化及突变构建的问题 已有2人参与
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求助里论坛里做枯草芽孢杆菌转化及突变构建的兄弟姐妹们： 1. 我在进行枯草芽孢杆菌化学转化和电转化的过程中，发现二者的假阳性都非常高，尤其是电转化，请问是什么原因导致？ 2. 目前用的突变构建系统是cre-loxp系统，已经做到将pTSC质粒转化入枯草芽孢杆菌，但是发现，将转化筛选后的阳性菌株37度培养16小时（加红霉素），菌株生长缓慢甚至还是清亮的，只好培养48小时，再10的5次方稀释，涂布红霉素10的平板，等长出单菌落后，分别划线于含壮观霉素+红霉素以及只含红霉素的LB平板，但是发现在含壮观霉素+红霉素的平板上，所有单菌落都可以生长，所以没有筛选到阳性菌株。请问大侠们是否我的步骤有问题？ 3.能否详述突变构建系统cre-loxp系统的使用方法？我再仔细检查对照到底问题出在哪里？ |
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4楼2017-06-09 15:25:38
young1983
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
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- 专业: 微生物学
2楼2017-06-05 22:16:04
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3楼2017-06-09 15:12:59
5楼2017-06-19 13:35:16