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linglan2612金虫 (正式写手)
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[求助]
求助关于枯草芽孢杆菌转化及突变构建的问题 已有2人参与
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求助里论坛里做枯草芽孢杆菌转化及突变构建的兄弟姐妹们: 1. 我在进行枯草芽孢杆菌化学转化和电转化的过程中,发现二者的假阳性都非常高,尤其是电转化,请问是什么原因导致? 2. 目前用的突变构建系统是cre-loxp系统,已经做到将pTSC质粒转化入枯草芽孢杆菌,但是发现,将转化筛选后的阳性菌株37度培养16小时(加红霉素),菌株生长缓慢甚至还是清亮的,只好培养48小时,再10的5次方稀释,涂布红霉素10的平板,等长出单菌落后,分别划线于含壮观霉素+红霉素以及只含红霉素的LB平板,但是发现在含壮观霉素+红霉素的平板上,所有单菌落都可以生长,所以没有筛选到阳性菌株。请问大侠们是否我的步骤有问题? 3.能否详述突变构建系统cre-loxp系统的使用方法?我再仔细检查对照到底问题出在哪里? |
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4楼2017-06-09 15:25:38
young1983
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
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- 红花: 6
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2楼2017-06-05 22:16:04
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3楼2017-06-09 15:12:59
5楼2017-06-19 13:35:16














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