应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助关于枯草芽孢杆菌转化及突变构建的问题
81/1返回列表
查看: 2575  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

linglan2612

金虫 (正式写手)

[求助] 求助关于枯草芽孢杆菌转化及突变构建的问题 已有2人参与

求助里论坛里做枯草芽孢杆菌转化及突变构建的兄弟姐妹们：
1. 我在进行枯草芽孢杆菌化学转化和电转化的过程中，发现二者的假阳性都非常高，尤其是电转化，请问是什么原因导致？
2. 目前用的突变构建系统是cre-loxp系统，已经做到将pTSC质粒转化入枯草芽孢杆菌，但是发现，将转化筛选后的阳性菌株37度培养16小时（加红霉素），菌株生长缓慢甚至还是清亮的，只好培养48小时，再10的5次方稀释，涂布红霉素10的平板，等长出单菌落后，分别划线于含壮观霉素+红霉素以及只含红霉素的LB平板，但是发现在含壮观霉素+红霉素的平板上，所有单菌落都可以生长，所以没有筛选到阳性菌株。请问大侠们是否我的步骤有问题？
3.能否详述突变构建系统cre-loxp系统的使用方法？我再仔细检查对照到底问题出在哪里？
回复此楼

» 猜你喜欢
任务分解，做好计划，减少情绪对抗
1楼 2017-06-05 00:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

young1983

木虫 (正式写手)
Bacillus难以转化，你的pTSC转化子很可能是假阳性。

发自小木虫IOS客户端
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2017-06-05 22:16:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heart920

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
3楼2017-06-09 15:12:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2017-06-09 15:25:38
已阅   申请MicEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

jerry110

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
linglan2612: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-06-24 01:07:17
质粒浓度高一些，比如转1ug，划转电转都可以，实验顺利！
赞一下 回复此楼
5楼2017-06-19 13:35:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

金鱼Unice

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jerry110 at 2017-06-19 13:35:16
质粒浓度高一些，比如转1ug，划转电转都可以，实验顺利！

可以分享一下化转方法吗？转化做了很久还是没有成功，质粒浓度够高，邮箱：1872855914@qq.com，非常感谢！邮箱号也是qq号，方便交流一下吗？跪谢！
赞一下 回复此楼
6楼2018-05-30 20:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

农大沐心

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jerry110 at 2017-06-19 13:35:16
质粒浓度高一些，比如转1ug，划转电转都可以，实验顺利！

你好，请问可以分享一下化转的方法吗？谢谢！邮箱18349380556@163.com

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2018-06-24 12:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青柠檬PCR

新虫 (正式写手)
你好，想问下可以换一个PTSC吗，我们有pdg148，pstop1622
赞一下 回复此楼
8楼2019-01-18 12:08:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 linglan2612 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 9/450 2026-09-18 09:16 by yS4CkeWDhD6V
[基金申请] 国社科系统bug了，是不是要放榜了？ +6 kynobel 2026-09-16 7/350 2026-09-18 08:26 by llionlee007
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:42 by cITaGg3p5edr
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 4/200 2026-09-18 03:18 by cITaGg3p5edr
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-18 02:30 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-18 00:28 by cITaGg3p5edr
[考博] 申博发邮件 +6 Lmengk 2026-09-15 7/350 2026-09-17 23:36 by Lmengk
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 23:28 by cuPZTDXS3VOd
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 4/200 2026-09-17 16:29 by 0ngsZVSCTS7z
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 13:39 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:15 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-17 12:39 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 4/200 2026-09-17 06:26 by k06BKNblrGRH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-17 05:50 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:04 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:04 by Tql5LQhh5rLK
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:14 by DgNGHc3h5tPl
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭