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RUSH夏至未至

铜虫 (小有名气)

[求助] 血小板聚集实验 已有1人参与

用血小板聚集仪测定生物碱抗血小板聚集作用,主要测定不同浓度其抑制率,结果加药组和空白组的聚集率差不多(都是大概百分之五六十),不管是测PRP还是洗涤血小板,诱导剂用了THR, AA, ADP都没有效果,药物也试了很多浓度,但很多文献上确实说了这个生物碱有抑制血小板聚集作用。有人说可能是药物析出来了,但是我选用了甲醇、乙腈和DMSO分别溶药物结果都不行,加药组读数还是和空白组一样,实在找不出原因了,求助!
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lics_1988

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
药物需要和调好的血小板提前孵育,再加诱导剂诱导聚集。(不同诱导剂的聚集率会不同,胶原,ATP,凝血酶都会不一样,50-60%应该是ATP)
有聚集曲线没有,可以看一下单加化合物对血小板聚集的变化,主要是看一下你的溶剂或药物本身有没有诱导聚集的作用;
如果选用的是ATP作诱导剂,需要注意ATP的诱导浓度,太高的话你的药物作用会显示不出来的(不必要死按说明书来,那个浓度和你使用的诱导剂批次有关,可以适当减低浓度,只要最后抑制率在50%以上就可以接受);
注意小皿的放置方向,检测过程中不要有气泡,血小板调数要一致,聚集曲线中要显示出添加诱导剂后开始聚集的变化...
天涯,云海,两茫茫!何日功成?还乡!醉笑陪公三万场,不用诉离殇!
2楼2017-06-01 15:54:19
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RUSH夏至未至

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lics_1988 at 2017-06-01 15:54:19
药物需要和调好的血小板提前孵育,再加诱导剂诱导聚集。(不同诱导剂的聚集率会不同,胶原,ATP,凝血酶都会不一样,50-60%应该是ATP)
有聚集曲线没有,可以看一下单加化合物对血小板聚集的变化,主要是看一下你的 ...

事先孵育了的,空白溶剂做的对照,THR和ADP做诱导剂,空白组(加溶剂组)聚集率在五六十,不知道为什么加药组测不出来
3楼2017-06-01 17:23:11
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lics_1988

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by RUSH夏至未至 at 2017-06-01 17:23:11
事先孵育了的,空白溶剂做的对照,THR和ADP做诱导剂,空白组(加溶剂组)聚集率在五六十,不知道为什么加药组测不出来...

1.试一下不加诱导剂,只加空白组或药物,看一下药物本身或溶剂是否存在诱导血小板聚集的作用,需要排除这种可能。
2.适当降低诱导剂的浓度,看聚集率变化,尽量选用低浓度的诱导剂,这样对药物刺激的作用会敏感一些。
3.药物浓度也需要适当调整一下,测试一下梯度变化,如果当前浓度没有抑制作用,可以10倍增加看是否会出现抑制。
如果聚集体系没有问题,那就只能是药物不对了!
天涯,云海,两茫茫!何日功成?还乡!醉笑陪公三万场,不用诉离殇!
4楼2017-06-02 08:37:40
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RUSH夏至未至

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lics_1988 at 2017-06-02 08:37:40
1.试一下不加诱导剂,只加空白组或药物,看一下药物本身或溶剂是否存在诱导血小板聚集的作用,需要排除这种可能。
2.适当降低诱导剂的浓度,看聚集率变化,尽量选用低浓度的诱导剂,这样对药物刺激的作用会敏感一 ...

谢谢!
5楼2017-06-04 19:27:43
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