应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RT后的cDNA分装问题
61/1返回列表
查看: 398  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yorkham

铜虫 (小有名气)

[交流] RT后的cDNA分装问题

RT后的cDNA分装的200ulPCR管能不能用DEPC水泡过？我师兄说用DEPC水泡过的管放置cDNA 对下步的PCR反应有影响！不明白，大家怎么看？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-01-12 11:41:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
好像不用DEPC吧，直接分装就行，影响不是很大，再说，PCR管之前都是经过处理的（质量好一点的）？
赞一下 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-01-12 20:21:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taotao4108

金虫 (正式写手)

无理
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
我这几天一直在做RI相关，已经开始有点烦PCR了

没有必要用DEPC处理，就是有RNase也没有关系，有人在反转录最后一步还加入RNase来降解未反转录完全的RNA，所以说即使用来放cDNA的管子有RNase也没有关系，换一个角度来看，这对我们下一步实验的实验是有百利而无一害
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2009-01-12 21:19:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pinene3862

银虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
话说有一种可能是，RT之后形成的是RNA-DNA杂交分子。如果太干净了后面的PCR反而不容易解链。
我们一般20微升反转录之后加等体积的无菌水，放-20度。过一夜，PCR很灵的。
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2009-01-12 23:34:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fenyang

银虫 (小有名气)
我师兄在中国农业科学院做客学习的，他说没有问题，且我们的实验结果也没有因此而受影响，这就说明不用DEPC处理亦可以进行PCR反应
赞一下 回复此楼
5楼2009-01-13 00:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yorkham

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by pinene3862 at 2009-1-12 23:34:
话说有一种可能是，RT之后形成的是RNA-DNA杂交分子。如果太干净了后面的PCR反而不容易解链。
我们一般20微升反转录之后加等体积的无菌水，放-20度。过一夜，PCR很灵的。

那用DEPC水处理了的管对PCR影响有多大？呵呵，我就是怕到时做不出来了，不过昨天试了试跑ACTIN，结果还可以！
赞一下 回复此楼
6楼2009-01-13 14:06:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yorkham 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +6 y7czhao 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:42 by zyxyz0804
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +6 丹青奶盖 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:04 by anny19840123
[考研] 296求调剂 +5 www_q 2026-03-20 5/250 2026-03-26 12:56 by 3Strings
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭