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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物设计
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干了这杯毒奶

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物设计 已有1人参与

给一段DNA设计引物，要扩增它，引物不都是与序列两段互补嘛，我用primer6和NCBI设计生成怎么都是生成在序列的中间啊，不与开头的序列互补。第一次设计这个。
还有这个图片中的产物长度啥意思啊，我上面的问题也与这个有关

引物设计


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1楼 2017-05-30 23:22:33
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伤何处

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-05-31 06:31:06
图片应该讲的是设计SYBR GREEN染料法荧光定量PCR引物的步骤，不是讲的PCR扩增。我好久没用primer6了，不太记得具体操作= =  你设计的引物片段是在序列中间，可能是你选择的参数是在片段内设计引物扩增特定长度的引物，而不是扩增你选定的全长片段。你试下把amplification length 设置成你的目的片段大小 例如1000-1000（不确定是否可以设置成这样 不行的话就999-1000）
赞一下(1人) 回复此楼
对也罢，错也罢；正也罢，逆也罢；通途也好，崎岖无妨……但问，吾心坚否？若坚，纵使歧路，以铁心，贯穿而过，亦为大道！不坚，便是坦途，也难登临绝顶，观险峰
2楼2017-05-30 23:56:01
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-31 06:31:49
本帖仅楼主可见
赞一下
3楼2017-05-31 01:06:35
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干了这杯毒奶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-05-30 23:56:01
图片应该讲的是设计SYBR GREEN染料法荧光定量PCR引物的步骤，不是讲的PCR扩增。我好久没用primer6了，不太记得具体操作= =  你设计的引物片段是在序列中间，可能是你选择的参数是在片段内设计引物扩增特定长度的引物 ...

谢谢！

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4楼2017-05-31 08:11:58
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引物设计是看你目的是什么的，网上的这些引物设计方案你一定要看清是用来做什么的！
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欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
5楼2017-06-02 22:59:02
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