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干了这杯毒奶

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物设计 已有1人参与

给一段DNA设计引物,要扩增它,引物不都是与序列两段互补嘛,我用primer6和NCBI设计生成怎么都是生成在序列的中间啊,不与开头的序列互补。第一次设计这个。
还有这个图片中的产物长度啥意思啊,我上面的问题也与这个有关

引物设计


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伤何处

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-05-31 06:31:06
图片应该讲的是设计SYBR GREEN染料法荧光定量PCR引物的步骤,不是讲的PCR扩增。我好久没用primer6了,不太记得具体操作= =  你设计的引物片段是在序列中间,可能是你选择的参数是在片段内设计引物扩增特定长度的引物,而不是扩增你选定的全长片段。你试下把amplification length 设置成你的目的片段大小 例如1000-1000(不确定是否可以设置成这样 不行的话就999-1000)
对也罢,错也罢;正也罢,逆也罢;通途也好,崎岖无妨……但问,吾心坚否?若坚,纵使歧路,以铁心,贯穿而过,亦为大道!不坚,便是坦途,也难登临绝顶,观险峰
2楼2017-05-30 23:56:01
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匿名

用户注销 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-31 06:31:49
本帖仅楼主可见
3楼2017-05-31 01:06:35
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干了这杯毒奶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 伤何处 at 2017-05-30 23:56:01
图片应该讲的是设计SYBR GREEN染料法荧光定量PCR引物的步骤,不是讲的PCR扩增。我好久没用primer6了,不太记得具体操作= =  你设计的引物片段是在序列中间,可能是你选择的参数是在片段内设计引物扩增特定长度的引物 ...

谢谢!

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4楼2017-05-31 08:11:58
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)

引物设计是看你目的是什么的,网上的这些引物设计方案你一定要看清是用来做什么的!
欢迎讨论,小木虫未能及时回复,请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
5楼2017-06-02 22:59:02
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