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1002晶晶

新虫 (小有名气)

[求助] 请各位大神帮我解答一下,谢谢 已有1人参与

载体与目的片段为什么以1:3的比例呢
还有如果构建载体只能选用单酶切,如果保证插入片段的方向性呢

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莫等闲111

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这个要等长出转化子测序才能确定。

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站内信:http:///muchong.com/bbs/box.php评分及查找应助者发送的密码http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7465070&fpage=1
2楼2017-05-30 21:09:56
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1002晶晶

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 莫等闲111 at 2017-05-30 21:09:56
这个要等长出转化子测序才能确定。

是回答第一个还是第二个呢?

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3楼2017-05-30 21:21:54
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莫等闲111

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4楼2017-05-30 21:57:11
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-05-30 22:40:07
1. 增加任何一反应物的浓度,都有利于反应向正向进行。而反应物浓度过高,会导致ABA形式或者BAB形式的串联,所以,最优组合大概是1:3-3:1
2. 酶切连接的话,单酶切只能通过后续菌PCR或者抽质粒酶切鉴定方向,选方向对的去测序。另外,用同源重组法可以定向向但酶切产物中克隆。
5楼2017-05-30 22:35:34
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1002晶晶

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2017-05-30 22:35:34
1. 增加任何一反应物的浓度,都有利于反应向正向进行。而反应物浓度过高,会导致ABA形式或者BAB形式的串联,所以,最优组合大概是1:3-3:1
2. 酶切连接的话,单酶切只能通过后续菌PCR或者抽质粒酶切鉴定方向,选方向 ...

谢谢你

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6楼2017-05-31 08:09:24
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1002晶晶

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1002晶晶 at 2017-05-30 21:21:54
是回答第一个还是第二个呢?
...

都回答嘛

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7楼2017-05-31 08:09:40
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1002晶晶

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 莫等闲111 at 2017-05-30 21:57:11
我回答的是第二个

好的,谢谢

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8楼2017-05-31 08:09:54
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