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RNAi转染实验 已有2人参与
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大家好，我最近在做毕设实验，有些疑问想咨询下大家。 细胞是鼻咽癌细胞CNE-2 基因是krupple家族的某个基因 1.我是做RNAI的，目前打算做瞬转和稳转， 瞬转的方案是，打算合成siRNA，通过lipo2000导入细胞。 我想解决的是以下的问题，求助各位大神指点迷津。 瞬转： 1.测转染效率的话，大概什么实验方法比较好一点？ 2.如果用带荧光标记的去转染，对转染效率影响大不大？ 3.在哪些方面需要特别注意的。 稳转： 我目前查到的有3个质粒选择pcDNA3.1和PGenesil1还有pGPU6/RFP/Neo 然后用G418筛选稳定转染细胞。 有大神用这三个做过实验吗，能否提供一下自己在实验中遇到的问题，或者给些建议。谢谢啦~~ 我听有个老师说pGPU6/RFP/Neo在筛选稳定转染细胞的时候比较困难。 还有我还需要知道关于质粒的哪些资料，去查询，然后优化我的实验方案， 因为只有一年的时间，还要准备考研，想提高一下效率，所以实验方面特别谨慎。 求各路大神支招！！！！！！！！ |
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2楼2017-06-05 08:58:29
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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Problematic cell line: Probably contaminated. On the basis of the STR profile (PubMed=18196576) it is identical to CNE-1 and seems to be a hybrid of Hela and of cell line of unknow origin. Was originally thought to originate from a nasopharyngeal carcinoma from a male patient. 只是想该诉你一下这个细胞污染了 |
3楼2017-07-28 14:31:17
