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籣103103

铜虫 (小有名气)

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[交流] 细胞培养注意：已有2人参与

a.实验进行前，先摆好操作台，开启操作台及无菌室紫外灯灭菌30-60min;
b.灭菌后关闭无菌室、操作台紫外，并开启日光灯15-20min后打开操作台和无菌室加装滤网的通风系统5-10min以降低臭氧浓度（减少对操作人员的伤害），开始实验。
c. 实验人员必须穿好实验服，戴好口罩及手套后方可进入实验室。这一方面可以减少无菌室的污染，一方面可以保护实验员的安全。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台，并且操作期间切不可弄伤手部及接触感染源的皮肤。
d.实验操作前用75%酒精擦拭工作区域，并应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作,在酒精灯附近操作。
e.实验时避免经过培养皿或试剂瓶上空，小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口。
g.为防止交叉污染，细胞培养液（DMEM、RPMI-1640等）应分装标记使用。一种细胞使用对应瓶分装的培养基。
h.培养基使用前调整温度至37℃。
i.Trypsin、FBS、NBS应分装使用，避免反复冻融。
j.经常检查细胞培养箱内的CO2的浓度、温度、湿度等，查看CO2 钢瓶的内外压力表，定期检查操作台及无菌室的通风过滤系统、紫外杀菌灯等，并注意维护，定期更换。

附：
紫外线杀菌器：

一：紫外线杀菌器杀菌原理

是利用紫外线灯管辐照强度，即紫外线杀菌灯所发出之辐照强度，与被照消毒物的距离成反比。当辐照强度一定时，被照消毒物停留时间愈久，离杀菌灯管愈近，其杀菌效果愈好，反之愈差。

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