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燕子sy

银虫 (小有名气)

[求助] 求助,SiHa宫颈癌细胞的总蛋白提取 已有1人参与

本人最近在提SiHa的总蛋白,9cm的皿,细胞长到90%,加300-500微的碧云天的ripa(强),冰浴30min,每隔5分钟振摇1次,12000rpm离心10min,吸取上清,问题来了,底部总是有很多拉丝的透明粘液,沉淀不下去,一吸就上来,蛋白得率也总是非常低,都不到1mg/mL。
求助,这是什么原因呢,裂解液加多加少都试过,裂解时间也延长至1h,就是不行,严重影响后面的实验进度,求大神赐教。
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我比小强还小强,越挫越勇!
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15113546664

新虫 (初入文坛)

9楼2017-06-30 15:48:27
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西大王研

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你试过用细胞刮刀收集一下么,

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扶朕起来,朕还能学
2楼2017-05-27 13:49:57
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燕子sy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 西大王研 at 2017-05-27 13:49:57
你试过用细胞刮刀收集一下么,

先刮刀收集细胞,离心,除上清,再加ripa,我们也试过几次,也是不行。
我比小强还小强,越挫越勇!
3楼2017-05-27 16:14:05
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爱点缀在冬初

新虫 (小有名气)

加完裂解液,后,半小时再用细胞刮试试,是不是细胞碎片

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4楼2017-06-08 13:30:41
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