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重组蛋白的纯化 已有2人参与
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重组蛋白的纯化 1. 重组蛋白 重组蛋白是利用重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质,即人工设计的蛋白分子. 2. 重组蛋白的制备流程 基因筛选→基因重组→基因克隆→克隆筛选→蛋白表达→蛋白纯化 基因筛选：即筛选到可翻译表达目的蛋白的基因序列 基因重组：即将到的目的基因序列和其它辅助基因（表达质粒等）序列连接起 来，形成新的基因序列 基因克隆：把重组的基因序列导入可繁殖的受体细胞中 克隆赛选：将带有重组基因的克隆细胞从细胞群中赛选出来 蛋白表达：将克隆细胞扩大培养，在培养中让目的基因得以翻译表达，表达出 蛋白 3. 重组蛋白表达受体细胞的分类 1）原核生物细胞：主要是大肠杆菌、也有其它的比如枯草芽孢杆菌等 2）真核生物细胞：主要是酵母菌 3）哺乳动物细胞：主要是CHO细胞 4）植物组织细胞：比如水稻胚乳细胞 5）动物组织细胞：比如奶牛乳腺细胞 4. 按结构重组蛋白分类 1）标签融合重组蛋白：带有非自身特定氨基酸序列 2）无标签重组蛋白：无自身以外氨基酸序列 5. 按表达后蛋白的存在形式分类 1）胞内可溶性表达蛋白：贮存在表达细胞内且以单体存在于细胞内 2）胞内包涵体表达蛋白：贮存在表达细胞内但以聚合体状态存在 3）胞外分泌型表达蛋白：贮存在表达细胞的培养液中  1.png  2.png |
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