24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3985)
>文献求助 (426)
>导师招生 (370)
>虫友互识 (364)
>休闲灌水 (242)
>考博 (168)
>硕博家园 (124)
>招聘信息布告栏 (116)
>博后之家 (96)
>论文投稿 (89)
>基金申请 (69)
>公派出国 (63)
>考研 (61)
>论文道贺祈福 (55)
>找工作 (45)
>教师之家 (37)

返回列表

hc-material

专家顾问 (职业作家)

专家经验: +702
BioEPI: 1
应助: 517 (博士)
金币: 462.9
散金: 18028
红花: 313
帖子: 3594
在线: 518.8小时
虫号: 4027804
注册: 2015-08-18
性别: GG
专业: 核技术及其应用
管辖: 生物科学

[交流] 重组蛋白的纯化已有2人参与

重组蛋白的纯化
1. 重组蛋白
重组蛋白是利用重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质,即人工设计的蛋白分子.

2. 重组蛋白的制备流程
基因筛选→基因重组→基因克隆→克隆筛选→蛋白表达→蛋白纯化
基因筛选：即筛选到可翻译表达目的蛋白的基因序列
基因重组：即将到的目的基因序列和其它辅助基因（表达质粒等）序列连接起
            来，形成新的基因序列
基因克隆：把重组的基因序列导入可繁殖的受体细胞中
克隆赛选：将带有重组基因的克隆细胞从细胞群中赛选出来
蛋白表达：将克隆细胞扩大培养，在培养中让目的基因得以翻译表达，表达出
               蛋白

3. 重组蛋白表达受体细胞的分类
   1）原核生物细胞：主要是大肠杆菌、也有其它的比如枯草芽孢杆菌等
   2）真核生物细胞：主要是酵母菌
   3）哺乳动物细胞：主要是CHO细胞
   4）植物组织细胞：比如水稻胚乳细胞
   5）动物组织细胞：比如奶牛乳腺细胞

4.    按结构重组蛋白分类
   1）标签融合重组蛋白：带有非自身特定氨基酸序列
   2）无标签重组蛋白：无自身以外氨基酸序列

5. 按表达后蛋白的存在形式分类
   1）胞内可溶性表达蛋白：贮存在表达细胞内且以单体存在于细胞内
   2）胞内包涵体表达蛋白：贮存在表达细胞内但以聚合体状态存在
   3）胞外分泌型表达蛋白：贮存在表达细胞的培养液中

1.png