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大家好: 有一大肠杆菌重组的蛋白,等电点5.0左右。用阴离子交换(DEAE、QFF)目的蛋白均流穿,PB或Tris缓冲液均如此,尝试过改变PH值及缓冲液浓度,效果不大,且流穿峰中杂蛋白也比较多。尝试疏水层析,20%硫酸铵目的蛋白大部分位于上清,30%硫酸铵目的蛋白几乎全部沉淀,但是沉淀蛋白为不可溶状态(缓冲液为PB,用Tris缓冲液溶出蛋白相对较多一些),在20%硫酸铵条件下,目的蛋白不挂柱,依旧流穿。等电点沉淀(PH5.0),蛋白沉淀后复溶不可溶。乙醇沉淀-20%乙醇沉淀蛋白复溶不溶。有没有经验丰富的大神指点迷津,跪谢! |
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3楼2017-06-01 13:16:10
capefly
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2楼2017-05-31 22:59:48
liaohongjun
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4楼2017-06-01 15:08:56
5楼2017-06-01 15:40:10














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