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LTcamellia

新虫 (初入文坛)

[求助] 分离 已有2人参与

第三块板,我这几个点挨的很近,极性小,可能是三萜或者甾体,已经过了两次硅胶了。只有400mg了,现在纠结用凝胶还是继续用硅胶过,大家能给些意见嘛? 你们在选用不同的柱子时一般考虑哪些问题?

分离


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雪米yin

新虫 (正式写手)

我想问下你之前是怎么过硅胶柱子的,像这种情况还是有一定分离度的建议用较小极性长时间冲可能分开

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2楼2017-05-25 23:06:17
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雪米yin

新虫 (正式写手)

你可以先上个凝胶试试,反正凝胶不怎么损失样品,没啥效果再用硅胶小极性流动相分离(可以采用湿法上样)

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3楼2017-05-25 23:15:34
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育伦

新虫 (初入文坛)

这个分离还是挺明显的,可以尝试上大板然后提纯再检测分离。

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4楼2017-05-25 23:16:36
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LTcamellia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 雪米yin at 2017-05-25 23:06:17
我想问下你之前是怎么过硅胶柱子的,像这种情况还是有一定分离度的建议用较小极性长时间冲可能分开

之前我一般选10倍到20倍的硅胶湿发装柱,1到1.5倍硅胶拌样之后上样,然后用PE:EA100:1  80:1 60:1 这样梯度加压冲下来,大约50ml接一瓶,点板之后有新的点出现就做一个组分。

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5楼2017-05-25 23:17:36
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雪米yin

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by LTcamellia at 2017-05-25 23:17:36
之前我一般选10倍到20倍的硅胶湿发装柱,1到1.5倍硅胶拌样之后上样,然后用PE:EA100:1  80:1 60:1 这样梯度加压冲下来,大约50ml接一瓶,点板之后有新的点出现就做一个组分。
...

我之前有一个样品,是两个点子的,但是这两个点是紧靠的,我用小极性等度洗脱,样品用流动相溶解湿法上的样,冲了好长时间,用西林瓶一小瓶一小瓶直接接,才收集到前面几瓶纯品,你可以参考一下。

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6楼2017-05-25 23:30:34
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476054377

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
量不多的还是直接上跟长凝胶先,特别是没经验的时候,过凝胶稳妥
7楼2017-05-26 19:18:02
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你好,今天

新虫 (小有名气)

建议先用凝胶,应该可以把最上面那个点与中间的那些点分开

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8楼2017-05-27 00:00:19
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myp334012

新虫 (初入文坛)

用凝胶,然后减压,压低极性冲,没问题

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all is well
9楼2017-05-27 10:16:39
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