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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » gDNA扩增全长序列分析内含子
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jinnini125

木虫 (小有名气)

[求助] gDNA扩增全长序列分析内含子 已有1人参与

我用cDNA全长引物去扩增gDNA全长序列，为了分析内含子，但是，我成功克隆出来的序列与cDNA比，居然只有TGA消失了……其余都一样。

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1楼 2017-05-25 21:29:59
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pfy323103

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
1楼: Originally posted by jinnini125 at 2017-05-25 21:29:59
我用cDNA全长引物去扩增gDNA全长序列，为了分析内含子，但是，我成功克隆出来的序列与cDNA比，居然只有TGA消失了……其余都一样。

若是以gDNA为模板扩增得到这就的结果，那说明你的基因编码区是无内含子的，所以就基本一样。

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2楼2017-05-25 23:03:24
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jinnini125

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pfy323103 at 2017-05-25 23:03:24
若是以gDNA为模板扩增得到这就的结果，那说明你的基因编码区是无内含子的，所以就基本一样。
...

反向引物里的TGA丢了，是不是克隆的问题

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3楼2017-05-26 08:23:14
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pfy323103

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by jinnini125 at 2017-05-26 08:23:14
反向引物里的TGA丢了，是不是克隆的问题
...

或许也会是测序不准确所致。

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4楼2017-05-26 10:52:57
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