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载体和目的基因连接不上啊,一学期了,求助
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谢大旭
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载体和目的基因连接不上啊,一学期了,求助
已有8人参与
载体4.4k,目的基因是易错pcr的产物1.4k,载体和目的基因都经过双酶切3个小时,然后胶回收,载体浓度10ng/微升,目的基因14ng/微升,之后按照物质的量比1:6进行连接,t4连接酶过夜,然后做转化,感受态是买的trans10,完全不长菌啊,求助
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MAS_rice
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1楼
2017-05-24 15:42:59
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FJie
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专业: 作物分子育种
嗯嗯,我也觉着两个浓度太低了
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4楼
2017-05-24 17:47:37
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谢大旭
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2楼
2017-05-24 16:43:18
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专业: 植物营养学
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2017-05-25 07:43:01
你的载体和目的基因的浓度也太低了,估计你吸两微升去电泳都没有条带
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竹杖芒鞋轻胜马,谁怕,一蓑烟雨任平生;回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴
3楼
2017-05-24 17:33:42
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谢大旭
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3楼
:
Originally posted by
MAS_rice
at 2017-05-24 17:33:42
你的载体和目的基因的浓度也太低了,估计你吸两微升去电泳都没有条带
跑胶还是有条带的,你们平时回收浓度多少呢?
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5楼
2017-05-24 18:06:32
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