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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

[交流] 请问在使载体末端平滑化时Klenow效率如何?

在使载体末端平滑化时(是双酶切产生的不同的粘性末端,都是5“端突出),希望补平后让载体自连,听说一般都用Klenow片段补平,但是又听说 这个片段效率不高,只有50%,有人建议用T4 DNA Polymerase,现在正在迷惑之中,请问版主到底哪个更好一点呢?
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


guoqin_shiyin(金币+1):谢谢参与
一般就是klenow~~~
还好啦,不会太低
用NEB的就绝对没问题
2楼2009-01-10 21:20:56
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

可是我买的是TAKARA的
3楼2009-01-10 22:18:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

........
用用看吧,只要有一点点能够补平并连上
还有成功转化
就能够通过挑单克隆扩增

克隆相关的工具酶,除了PCR的之外,NEB的最好了
4楼2009-01-10 22:53:25
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

请问KLENOW补平的基本步骤是什么啊,说明书上居然没有
5楼2009-01-12 13:44:09
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