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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问在使载体末端平滑化时Klenow效率如何？
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

[交流] 请问在使载体末端平滑化时Klenow效率如何？

在使载体末端平滑化时（是双酶切产生的不同的粘性末端，都是5“端突出），希望补平后让载体自连，听说一般都用Klenow片段补平，但是又听说 这个片段效率不高，只有50％，有人建议用T4 DNA Polymerase，现在正在迷惑之中，请问版主到底哪个更好一点呢？
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1楼 2009-01-10 20:46:52
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)
请问KLENOW补平的基本步骤是什么啊，说明书上居然没有
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5楼2009-01-12 13:44:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
guoqin_shiyin(金币+1):谢谢参与
一般就是klenow~~~
还好啦，不会太低
用NEB的就绝对没问题
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2楼2009-01-10 21:20:56
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)
可是我买的是TAKARA的
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3楼2009-01-10 22:18:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
........
用用看吧，只要有一点点能够补平并连上
还有成功转化
就能够通过挑单克隆扩增

克隆相关的工具酶，除了PCR的之外，NEB的最好了
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4楼2009-01-10 22:53:25
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