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汕头大学海洋科学接受调剂
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sjt0408

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR污染问题

最近一直在做荧光定量PCR实验,使用检测肺炎支原体核酸的商品试剂盒,试剂盒预混液中自带引物。但是最近的实验中阴性对照总是出现同阳性对照一致的阳性结果(之前实验中阳性、阴性有别可以区分),只加预混液mix与Taq酶,PCR结果也为阳性。怀疑是试剂出现了问题或者是实验室环境出现污染,哪位大神有没有遇见过类似的问题,请教一下解决方案,谢谢!
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女少年93

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主问题解决了吗,我也遇到了相似的问题,请问是什么原因啊?
2楼2017-05-28 17:22:57
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skull123

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

荧光PCR污染很常见,最好的方法是换一个实验室,东西全部用新的,
3楼2017-05-31 16:48:01
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shaofang

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

将所有的东西重新换新的,应该能解决!
4楼2017-06-02 16:14:50
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yucuiyuan00

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

只加预混液mix与Taq酶,PCR结果也为阳性,说明试剂本身可能被污染或环境被污染了,如果更换新的试剂盒,阴性对照仍然出现阳性结果,说明环境被污染了。
保持平常心❤
5楼2017-06-20 16:05:24
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LemnisCare

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

6楼2018-11-14 15:27:52
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WOAIDACHANG

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

7楼2019-04-21 23:50:10
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wnflyp

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.枪头,灭菌
2.手套,新的
3.水,新的
4.酶,新的
5.买一瓶去除气溶胶的喷雾
6.配制时去一个新的房间
7.点太多,好好想想,
假设你的枪头已经污染,可到导致你的酶也被污染,换新的或者一瓶新的加开封的这一瓶作为阴性对照,如果你们实验室不注意环境,核酸气溶胶应该是有的,买一瓶去除剂,不贵,喷洒在8连管,仪器,操作台上。
8楼2020-11-03 16:54:05
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