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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 学术帮助 » 荧光定量PCR污染问题
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sjt0408

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR污染问题

最近一直在做荧光定量PCR实验，使用检测肺炎支原体核酸的商品试剂盒，试剂盒预混液中自带引物。但是最近的实验中阴性对照总是出现同阳性对照一致的阳性结果（之前实验中阳性、阴性有别可以区分），只加预混液mix与Taq酶，PCR结果也为阳性。怀疑是试剂出现了问题或者是实验室环境出现污染，哪位大神有没有遇见过类似的问题，请教一下解决方案，谢谢！
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1楼 2017-05-22 11:15:22
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女少年93

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主问题解决了吗，我也遇到了相似的问题，请问是什么原因啊？
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2楼2017-05-28 17:22:57
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skull123

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

荧光PCR污染很常见，最好的方法是换一个实验室，东西全部用新的，
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3楼2017-05-31 16:48:01
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shaofang

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

将所有的东西重新换新的，应该能解决！
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4楼2017-06-02 16:14:50
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yucuiyuan00

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

只加预混液mix与Taq酶，PCR结果也为阳性，说明试剂本身可能被污染或环境被污染了，如果更换新的试剂盒，阴性对照仍然出现阳性结果，说明环境被污染了。
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保持平常心❤
5楼2017-06-20 16:05:24
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LemnisCare

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
6楼2018-11-14 15:27:52
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WOAIDACHANG

禁言 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
7楼2019-04-21 23:50:10
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wnflyp

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.枪头，灭菌
2.手套，新的
3.水，新的
4.酶，新的
5.买一瓶去除气溶胶的喷雾
6.配制时去一个新的房间
7.点太多，好好想想，
假设你的枪头已经污染，可到导致你的酶也被污染，换新的或者一瓶新的加开封的这一瓶作为阴性对照，如果你们实验室不注意环境，核酸气溶胶应该是有的，买一瓶去除剂，不贵，喷洒在8连管，仪器，操作台上。
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8楼2020-11-03 16:54:05
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