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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大肠杆菌S17-1化转
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tigerpaw

木虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌S17-1化转 已有1人参与

构建好的质粒一直导入不进大肠杆菌S17-1是怎么回事？（酶切验证质粒完全正确）之前做的都没问题
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聪明的人能洞察事物未来的发展趋势，他们在洪水来之前养鸭而不养鸡。
1楼 2017-05-21 10:03:04
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阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
您好，个人觉得原因有2，①这个质粒不适合这个菌，②这个s17-1电转效果可能更好一些。
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总会出现一个温柔的人，让你变得温暖，然后默默离开。
2楼2017-05-23 09:01:15
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二小神奇

新虫 (初入文坛)
1.通过什么方式判断的没有成功转入？抗性筛选还是重提质粒验证？
2.转化方式可以选择其他方式试试
3.这个质粒对大肠杆菌有没有损害？
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3楼2017-05-23 14:03:04
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tigerpaw

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 二小神奇 at 2017-05-23 14:03:04
1.通过什么方式判断的没有成功转入？抗性筛选还是重提质粒验证？
2.转化方式可以选择其他方式试试
3.这个质粒对大肠杆菌有没有损害？

之前构建的质粒都能高效地转进S17-1。一般通过抗性筛选后提质粒验证，都是假阳性。之前一直是化转，下次改电转试试。
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聪明的人能洞察事物未来的发展趋势，他们在洪水来之前养鸭而不养鸡。
4楼2017-05-23 14:37:51
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撑长篙的过客

新虫 (初入文坛)
楼主，我跟你一样，用s17和3064都转过，怎么都转不进去，你现在找到原因了吗

发自小木虫Android客户端
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5楼2018-01-09 18:29:19
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菊子0909

铁虫 (小有名气)
你好，我现在需要大肠杆菌S17-1，能否用我有的质粒跟你交换？谢谢！
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6楼2018-07-14 10:19:35
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