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經天

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] HPLC遇到的问题,急求!

最近做高效液相的时候发现出来的峰总是不对称,上去的很快,下来的很慢。不知道是怎么回事,试着改变流动相比例,检测波长,都没有找到原因,有没有谁也遇到这样的情况,请教一下解决的方法,谢谢!
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)

这就是所谓的拖尾峰。以上我自己的体会。呵呵
3楼2009-01-09 11:47:37
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
可能原因

色谱柱过载

干扰峰;杂质


硅胶表面未完全键合的
硅羟基的影响


色谱柱的滤网堵塞


柱外效应的影响;
死体积

色谱柱有“塌陷”、短流或断流
解决办法

减少样品体积;

改进样品预处理;
调节流动相的组成;

使用流动相改性剂(如三乙胺);
降低流动相的pH值;
使用碱性去活的色谱柱

更换滤网;使用柱前过滤系统;
将样品过滤

检查管路连接


更换色谱柱;
2楼2009-01-09 11:46:33
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康博

木虫 (正式写手)

呆虫虫。。。

最好把你的流动相说清楚点,这样大家才好判断啊,不过沙发说的也比较全了,试着去解决吧
..............................
4楼2009-01-09 12:42:36
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經天

铁杆木虫 (著名写手)

HPLC遇到的问题,急求!

我用的流动相:70%的色谱甲醇
柱子本身应该没问题,因为还有师姐一起跑,她的样品检测很正常,就我的不行。
我跑的是sigma的标准品,99.9%的,标品跑不出来。
希望大家多指教啊

[ Last edited by 經天 on 2009-1-10 at 10:25 ]
一种与世无争的上进,内在的坚毅和质朴无华的大度!【穷吾一生而追求之!】
5楼2009-01-10 10:23:53
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