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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » HPLC遇到的问题，急求！
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經天

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] HPLC遇到的问题，急求！

最近做高效液相的时候发现出来的峰总是不对称，上去的很快，下来的很慢。不知道是怎么回事，试着改变流动相比例，检测波长，都没有找到原因，有没有谁也遇到这样的情况，请教一下解决的方法，谢谢！
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1楼 2009-01-09 11:26:44
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~~
可能原因

色谱柱过载

干扰峰；杂质


硅胶表面未完全键合的
硅羟基的影响


色谱柱的滤网堵塞


柱外效应的影响；
死体积

色谱柱有“塌陷”、短流或断流
解决办法

减少样品体积；

改进样品预处理；
调节流动相的组成；

使用流动相改性剂（如三乙胺）；
降低流动相的pH值；
使用碱性去活的色谱柱

更换滤网；使用柱前过滤系统；
将样品过滤

检查管路连接


更换色谱柱；
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2楼2009-01-09 11:46:33
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
这就是所谓的拖尾峰。以上我自己的体会。呵呵
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3楼2009-01-09 11:47:37
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康博

木虫 (正式写手)

呆虫虫。。。
最好把你的流动相说清楚点，这样大家才好判断啊，不过沙发说的也比较全了，试着去解决吧
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..............................
4楼2009-01-09 12:42:36
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經天

铁杆木虫 (著名写手)

HPLC遇到的问题，急求！

我用的流动相：70%的色谱甲醇
柱子本身应该没问题，因为还有师姐一起跑，她的样品检测很正常，就我的不行。
我跑的是sigma的标准品，99.9%的，标品跑不出来。
希望大家多指教啊

[ Last edited by 經天 on 2009-1-10 at 10:25 ]
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5楼2009-01-10 10:23:53
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經天

铁杆木虫 (著名写手)

HPLC遇到的问题，急求！

终于跑出来了
换了个机器 还换了个柱子才搞定
谢谢各位了
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6楼2009-01-11 20:14:23
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crane2002424

银虫 (正式写手)
硬件问题
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7楼2009-01-12 14:36:29
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