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lis007

铜虫 (初入文坛)

[求助] 玉米 SSR 跑PAGE图 已有1人参与

提取玉米种子DNA后PCR    变性后用4.5%的尿素聚丙烯酰氨凝胶在1300V  80W  跑胶45min 后  如下图情况：目的条带160~190bp  但是目的条带弥撒严重  无法读带    PCR用全世金的Mix  非特异性条带有点多  PCR如何改进？PAGE图上的目的条带要怎么调整跑胶条件？  求大神帮助！！！

玉米 SSR  跑PAGE图
玉米SSR.jpg
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1楼 2017-05-16 17:00:20
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mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
干嘛加尿素，不加也好吧！胶做的太差。DNA质量要检测，电泳为主

发自小木虫Android客户端
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2楼2017-05-16 17:10:17
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lis007

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mlxmiao at 2017-05-16 17:10:17
干嘛加尿素，不加也好吧！胶做的太差。DNA质量要检测，电泳为主

问题已解决   不是胶  也不是DNA的问题  非常感谢
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3楼2017-05-19 13:35:29
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大东红日

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lis007 at 2017-05-18 23:35:29
问题已解决   不是胶  也不是DNA的问题  非常感谢...

什么问题？

发自小木虫Android客户端
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4楼2017-05-19 14:07:51
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UU01

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lis007 at 2017-05-19 13:35:29
问题已解决   不是胶  也不是DNA的问题  非常感谢...

您好，我最近也在做SSR，条带弥撒严重，请问楼主是怎样解决的呢，万分感谢
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5楼2017-12-16 09:29:53
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UU01

新虫 (初入文坛)
想问一下楼主是怎样解决弥撒问题的呢，因为我最近也在做SSR，万分感谢
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6楼2017-12-16 09:31:35
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lis007

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by UU01 at 2017-12-16 09:31:35
想问一下楼主是怎样解决弥撒问题的呢，因为我最近也在做SSR，万分感谢

减少进样量  PCR出来1.5ul   这个量根据自己的情况可以调整优化   高压1200v跑35min
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7楼2018-04-18 14:57:54
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