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何亚娟

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师您好,我做高效液相的时候流动相用的是乙腈和0.2%的磷酸... 已有2人参与

老师您好,我做高效液相的时候流动相用的是乙腈和0.2%的磷酸,在210nm处检测,平衡基线平衡了两个多小时最后在-200多平衡了,我想问一下这是怎么回事?该怎么处理?我用的是安捷伦,同学说可以按一下平衡,但是我按了之后基线又往下跑了,进样后还出现了倒峰,请问这该怎么处理?

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formulalin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从你的谱图来看是没有平衡好,但是你平衡2h,时间已经足够。另外你的基线一直来回波动,极有可能是系统不干净导致的,建议你重新冲洗系统:5%稀硝酸(1h)——纯化水(将系统冲洗至中性)——流动相,但是千万不要接色谱柱。必要的话也可以100%异丙醇冲洗。
7楼2017-05-17 09:07:22
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站岗的稻草人

金虫 (小有名气)

是不是仪器的设定有问题,建议打电话问一下安捷伦的维修工程师。
2楼2017-05-15 10:24:37
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56954594

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个流动相一般来说平衡十几二十分钟就平衡了,2小时太离谱了,如果你在-200平衡了,你再归零,又掉下来不符合逻辑,所以我怀疑就没平衡。还是上图说明下比较好。出倒峰,要么系统有杂质跟设置极性相反,或者有可能是灯能量不足也有可能
3楼2017-05-15 13:40:22
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胡少辉

新虫 (初入文坛)

低波长下容易出现倒峰,但是你的黑色基线不能归零就有点不对劲了,有可能是仪器没有平衡好,或者系统里有气泡

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4楼2017-05-15 14:04:53
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