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【求助】使DNA杂化的环境缓冲溶液离子强度该低还是高?
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gutidog
金虫
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虫号: 366966
注册: 2007-05-10
性别:
MM
专业: 药剂学
[交流]
【求助】使DNA杂化的环境缓冲溶液离子强度该低还是高?
如题,两条完全互补的单链DNA在缓冲溶液中杂交时,我看有的文献用高离子强度的13*SSC(NaCl&柠檬酸钠配置)甚至20*SSC缓冲溶液,似乎离子强度大点为好,但是有的文献又只用了1*SSC,离子强度又不大,到底应该哪个啊?!
希望做过的虫虫指点一下!
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从一个深渊跳入另一个!
1楼
2009-01-08 13:06:05
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ymj002
木虫
(小有名气)
应助: 1
(幼儿园)
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帖子: 204
在线: 14.9小时
虫号: 53819
注册: 2004-09-19
性别: GG
专业: 生物物理、生物化学与分子
★ ★
yusen_1982(金币
+2
,VIP
+0
):谢谢应助,祝新年好运!!!!!
2-4 09:41
离子强度和杂交严谨性相关,如果要求严谨性高选用高离子强度,如果低则选用低离子强度。
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3楼
2009-02-04 08:41:26
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wenzhanwu
金虫
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红花: 1
帖子: 538
在线: 161.3小时
虫号: 557370
注册: 2008-05-12
性别:
MM
专业: 电化学分析
★ ★
yusen_1982(金币
+2
,VIP
+0
):谢谢应助,祝新年好运!!!!!
单链的DNA侧链磷酸根带大量负电荷,当溶液中离子浓度比较高时正离子(eg,Na+ or K+)能够与其静电吸附,负电荷被中和,单链的DNA处于伸展状态,杂交效率比较高
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2楼
2009-01-08 14:00:29
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