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gutidog

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】使DNA杂化的环境缓冲溶液离子强度该低还是高?

如题,两条完全互补的单链DNA在缓冲溶液中杂交时,我看有的文献用高离子强度的13*SSC(NaCl&柠檬酸钠配置)甚至20*SSC缓冲溶液,似乎离子强度大点为好,但是有的文献又只用了1*SSC,离子强度又不大,到底应该哪个啊?!
希望做过的虫虫指点一下!
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ymj002

木虫 (小有名气)

★ ★
yusen_1982(金币+2,VIP+0):谢谢应助,祝新年好运!!!!! 2-4 09:41
离子强度和杂交严谨性相关,如果要求严谨性高选用高离子强度,如果低则选用低离子强度。
3楼2009-02-04 08:41:26
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wenzhanwu

金虫 (正式写手)

★ ★
yusen_1982(金币+2,VIP+0):谢谢应助,祝新年好运!!!!!
单链的DNA侧链磷酸根带大量负电荷,当溶液中离子浓度比较高时正离子(eg,Na+ or K+)能够与其静电吸附,负电荷被中和,单链的DNA处于伸展状态,杂交效率比较高
2楼2009-01-08 14:00:29
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