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Red大肠杆菌基因敲除卡那霉素筛选问题 已有1人参与
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开始做Red系统的E. coli基因敲除，电转后涂布卡那霉素平板（100ug/ml）没有菌落长出来。不知道是不是抗生素浓度太大的问题。 1、第一次电转PCR片段成功后，卡那霉素平板（50ug/ml）上长出了单菌落，随后又出现了很多小菌落，以为是抗生素浓度低未抑制。 2、随后又做了好几次感受态做电转，电转后涂布卡那霉素平板（100ug/ml）都没有菌落长出来。 请教大神高手，不胜感激。 |
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junior850621
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应该是感受态制备的问题，阿拉伯糖要新鲜配置，因为这个的存储期短，容易变构，其实用最新的crispr cas系统做大肠杆菌的敲除，效率更高，个人看法而已 发自小木虫IOS客户端 |
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7楼2017-05-07 11:50:57
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