| 查看: 1997 | 回复: 8 | ||
[求助]
Red大肠杆菌基因敲除卡那霉素筛选问题 已有1人参与
|
|
开始做Red系统的E. coli基因敲除，电转后涂布卡那霉素平板（100ug/ml）没有菌落长出来。不知道是不是抗生素浓度太大的问题。 1、第一次电转PCR片段成功后，卡那霉素平板（50ug/ml）上长出了单菌落，随后又出现了很多小菌落，以为是抗生素浓度低未抑制。 2、随后又做了好几次感受态做电转，电转后涂布卡那霉素平板（100ug/ml）都没有菌落长出来。 请教大神高手，不胜感激。 |
回复此楼» 猜你喜欢
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有8人回复
-
最失望的一年
已经有17人回复
-
为什么nbs上溴 没有产物点出现呢
已经有6人回复
-
求推荐博导
已经有4人回复
-
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有34人回复
-
求助一下有机合成大神
已经有4人回复
-
求推荐英文EI期刊
已经有5人回复
-
26申博
已经有3人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有10人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
junior850621
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 29 (小学生)
- 金币: 11152.6
- 红花: 7
- 帖子: 1044
- 在线: 512.5小时
- 虫号: 868883
- 注册: 2009-10-11
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
2楼2017-05-05 20:34:09
3楼2017-05-06 08:06:19
小冀-
版主 (著名写手)
- MicEPI: 8
- 应助: 713 (博后)
- 贵宾: 3.033
- 金币: 11446.9
- 散金: 1055
- 红花: 82
- 帖子: 2509
- 在线: 445.9小时
- 虫号: 1521695
- 注册: 2011-12-03
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
- 管辖: 微生物
向日葵和梦缘
4楼2017-05-06 11:53:12
5楼2017-05-06 15:36:44
小冀-
版主 (著名写手)
- MicEPI: 8
- 应助: 713 (博后)
- 贵宾: 3.033
- 金币: 11446.9
- 散金: 1055
- 红花: 82
- 帖子: 2509
- 在线: 445.9小时
- 虫号: 1521695
- 注册: 2011-12-03
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
- 管辖: 微生物
6楼2017-05-07 09:37:07
张凡云
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 13402.7
- 散金: 3094
- 红花: 13
- 帖子: 4099
- 在线: 1483.9小时
- 虫号: 2426111
- 注册: 2013-04-19
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
|
应该是感受态制备的问题，阿拉伯糖要新鲜配置，因为这个的存储期短，容易变构，其实用最新的crispr cas系统做大肠杆菌的敲除，效率更高，个人看法而已 发自小木虫IOS客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
7楼2017-05-07 11:50:57
8楼2017-05-07 16:14:09
9楼2017-05-07 16:17:38