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凌霄冻金虫 (小有名气)
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质粒（双酶切条带正常）转染BL21(DE3）
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请教，我的载体pet28a连接目的片段后，转入DH5a中菌落正常生长，提取质粒（双酶切条带正常）转染BL21(DE3)划平板（卡拉平皿），过夜培养不生长？ 我的操作 100ul感受态加10ul质粒，冰上30min，热激90秒，冰浴3min，加无抗LB900ul,37度180rmp摇1小时，200ul涂板(含卡拉25ug/ml).37度过夜，无菌落。请大神赐教。 |
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