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凌霄冻金虫 (小有名气)
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质粒(双酶切条带正常)转染BL21(DE3)
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请教,我的载体pet28a连接目的片段后,转入DH5a中菌落正常生长,提取质粒(双酶切条带正常)转染BL21(DE3)划平板(卡拉平皿),过夜培养不生长? 我的操作 100ul感受态加10ul质粒,冰上30min,热激90秒,冰浴3min,加无抗LB900ul,37度180rmp摇1小时,200ul涂板(含卡拉25ug/ml).37度过夜,无菌落。请大神赐教。 |
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2楼2017-05-15 10:59:48
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